طراحی پرایمرهای اختصاصی بوردتلا پرتوسیس با استفاده از تکنیک Real-time PCR و مقایسه حساسیت و ویژگی آن‌ها با کیت تجاری

زمینه و اهداف: در کشور ما واکسیناسیون سیاه‌سرفه سال‌هاست که انجام می‌شود و در 85% موارد ایمنی کامل به وسیله واکسیناسیون و یا احیاناً ابتلا به بیماری ایجاد گردیده است؛ لذا همه‌گیری های 5-2 ساله ناشی از شیوع مجدد در بزرگ‌سالان غیر ایمن است که سبب ابتلا کودکان و شیرخواران می‌شود. روش Real-time PCR با توجه به نواحی ژنومی محافظت‌شده و میزان اختصاصیت پرایمر مورد استفاده می‌تواند یک روش جایگزین آسان، ارزان، سریع و با حساسیت بالا باشد. مواد و روش کار: در یک مطالعه کاربردی 170 سوآب نازوفارنژیال از کودکان شیرخوار باسابقه سرفه بیش از 2 هفته به دست آوردیم. در اولین مرحله تشخیص باکتری بوردتلا پرتوسیس با روش کشت و Real-time PCR با استفاده از کیت خارجی انجام شد و سپس با پرایمرهای جدید طراحی‌شده، آزمایش تکرار گردید. یافته‌ها: عملکرد پرایمرهای مذکور به منظور تشخیص بیماری سیاه‌سرفه بر اساس یافته‌های کیت تجاری و راهنمای کلاسیک تشخیصی (WHO) و (CDC) قابل‌قبول است. در این پروژه نتایج حاصل از کیت تجاری با روش طراحی‌شده مطابقت داشته و حداقل کپی قابل‌تشخیص در این روش 10copies/ml در مقایسه با کیت تجاری که 20copies/ml بود بدست آمد. همچنین در این روش حساسیت و ویژگی100% بدست آمد. نتیجه‌گیری: آزمون Real-time PCR با پرایمرهای جدید، در مقایسه با روش کشت، آزمون تائیدی مناسب‌تر, با حساسیت، ویژگی و ارزش های اخباری بالاتر برای تشخیص بیماری است. با این روش می‌توان به تشخیص سریع‌تر بیماران و درمان آنها پرداخت و از سایر عوارض بیماری جلوگیری کرد.